多肽合成仪操作三步法：快速上手与维护技巧

　　第一步：多肽合成仪操作前准备——奠定成功基础
 

　　环境与设备检查
 

　　选择干燥、清洁、温度稳定的场所(20℃±5℃)，避免潮湿、高温或灰尘干扰。
 

　　确保仪器安装平稳，电源电压、频率与设备要求匹配(如压缩空气压力“AIR”表需60-100psi，“N₂”表需5-10psi)。
 

　　检查溶剂储液瓶、气体管道连接是否紧密，防止泄漏。
 

　　材料与试剂准备
 

　　准备高纯度氨基酸、活化试剂(如HBTU)、溶剂(DMF、DCM)及树脂，确保无杂质。
 

　　根据合成方案称量试剂，严格按比例混合(如3倍过量氨基酸用于偶联反应)。
 

　　将树脂加入反应器，用DCM溶胀后抽干，再用DMF洗涤去除杂质。
 

　　参数设定与校准
 

　　输入多肽序列，设定反应条件(温度、时间、溶剂比例)。
 

　　示例：Fmoc脱保护(20%哌啶/DMF，5分钟×2次)；偶联反应(3倍过量氨基酸，1小时)。
 

　　运行设备自检程序，校准温度、压力、取液针等参数，确保传感器精度。
 

　　第二步：合成过程操作——核心步骤解析
 

　　启动合成程序
 

　　打开合成仪电源及压缩空气开关，启动预设程序。
 

　　仪器自动完成脱保护(如Fmoc基团去除)、偶联(氨基酸交联)、洗涤循环，全程监测反应温度、压力及pH值。
 

　　关键操作要点
 

　　脱保护：使用碱性溶剂(如20%哌啶/DMF)去除氨基保护基团，需重复2次以确保彻底。
 

　　偶联反应：将活化后的氨基酸溶液注入反应室，补充DMF至适当浓度，搅拌1小时形成肽键。
 

　　洗涤：每步反应后用DMF清洗，清除未反应物质和副产物，减少杂质积累。
 

　　实时监控与调整
 

　　通过UV吸光度或质谱分析监测反应进程，确保每一步按预期进行。
 

　　若发现反应液不均匀，调整搅拌器转速；若温度异常，检查加热盘位置。
 

　　第三步：合成后处理与维护——保障长期稳定
 

　　产物收集与纯化
 

　　加入裂解液(如TFA/水/三异丙基硅烷=95:2.5:2.5)，室温搅拌2小时，将多肽从树脂上裂解下来。
 

　　过滤除去树脂，浓缩裂解液后用乙醚沉淀粗肽，通过离心、洗涤得到固体产物。
 

　　使用高效液相色谱(HPLC)纯化，去除杂质，获得高纯度多肽(>95%)。
 

　　多肽合成仪设备清洁与保养

 

　　即时清洁：合成结束后，立即用乙醇或去离子水清洗反应容器、针头、泵头和管路，避免残留试剂腐蚀设备。
 

　　定期维护：每月更换磨损部件(如密封圈、针头)，校准传感器精度；每季度润滑机械部分，保持运行顺畅。
 

　　长期存放：若设备闲置，清洗干净后拆卸存放在干燥、通风处，防止生锈或受潮。
 

　　故障排查与记录
 

　　常见问题：泵头漏液(更换密封圈)、反应容器温度过高(调整加热盘位置)、设备无法开机(检查电源及控制板)。
 

　　记录与报告：详细记录每一步操作参数(试剂用量、反应时间、温度)及产物纯度，生成实验报告，为后续优化提供依据。